自考03025生物化学及生物化学技术（实践）考试大纲（2003年版）

［03025］ 生物化学与生化技术实验大纲浙江省高等教育自学考试办公室二 OO 三年六月（一）实验的目的与要求通过实验，使学生理解理论知识，使理论联系实际，使学生掌握最基本的生化实验和制备方法，学会使用常见的分析仪器和生化试剂的配制，加强生化知识和生化技术的应用了解一定的生化制药工艺的设计。

实验一醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白根据血清蛋白中各种蛋白质的分子量及 PI 值的不同，利用醋酸纤维素薄膜进行分离，经过氨基黑染色以及漂洗后，可看到四根蛋白条带。

1．掌握电泳分离血清蛋白的基本操作方法。

2．熟悉醋酸纤维素薄膜分离血清蛋白的基本原理。

实验二酪蛋白的制备

一、实验内容

酪蛋白在其等电点时溶解度很低，利用这一性质，将牛乳调至 PH4.8，酪蛋白可从牛乳中分离出来。

三、

1．掌握从牛乳中制备酪蛋白的基本操作方法。

2．熟悉从牛乳中制备酪蛋白的原理。

实验三酶的特异性（专一性） 以唾液淀粉酶和蔗糖酶对淀粉和蔗糖的作用为例，说明酶的特异性。

1．掌握检查酶的特异性的方法及其原理。

2．熟悉酶的特异性。

实验四谷丙转氨酶活力的测定谷丙转氨酶作用的产物之一为丙酮酸，丙酮酸能与 2，4-二硝基苯肼作用生成在碱性溶液中呈棕红色的丙酮酸-2，4-二硝基苯腙，颜色的深浅与丙酮酸生成量成正比，用同样处理的标准丙酮酸进行比色，求得丙酮酸的生成量，即可换算为谷丙转氨酶活性单位。

1、掌握谷丙转氨酶活性测定的实验方法

2、熟悉酶活性测定的基本原理实验五糖酵解中间产物的鉴定利用碘乙酸对糖酵解过程中 3—磷酸甘油醛脱氢酶的抑制作用，使 3—磷酸甘油醛不再向前变化而积累。2，4 二硝基苯肼与 3—磷酸甘油醛在碱性条件下形成 2，4 二硝基苯肼—丙糖的棕色复合物，其棕色程度与 3—磷酸甘油醛量成正比。

1．掌握糖酵解过程的某一中间步骤利用抑制剂来研究中间代谢的方法。

2．熟悉糖酵解过程。

（二）实验内容与课时安排序号学时酪蛋白的制备醋酸纤维薄膜分离血清蛋白酶的特异性谷丙转氨酶活力的测定糖酵解中间产物的鉴定合计